Technika chromogenna jest jedną z trzech technik, które obejmują również technikę skrzepu żelowego i technikę turbidymetryczną do wykrywania lub oznaczania ilościowego endotoksyn bakterii Gram-ujemnych za pomocą lizatu amoebocytów ekstrahowanego z błękitnej krwi kraba podkowiastego (Limulus polifemus lub Tachypleus tridentatus).Można go sklasyfikować jako test chromogenny z punktem końcowym lub test kinetyczno-chromogenny w oparciu o konkretną zastosowaną zasadę testu.
Zasada reakcji jest następująca: lizat amebocytów zawiera kaskadę enzymów proteazy serynowej (proenzymów), które mogą być aktywowane przez endotoksyny bakteryjne.Endotoksyny aktywują proenzymy, wytwarzając aktywowane enzymy (zwane koagulazą), te ostatnie katalizują rozkład bezbarwnego substratu, uwalniając produkt pNA o żółtym zabarwieniu.Uwolniony pNA można zmierzyć fotometrycznie przy 405 nm.Absorbancja jest dodatnio skorelowana ze stężeniem endotoksyn, wówczas można odpowiednio określić ilościowo stężenie endotoksyn.
Czas publikacji: 29 września 2019 r
