Test na endotoksynę bakteryjną (BET) przeprowadza się w większości nowoczesnych laboratoriów w kontrolowanych warunkach, co jest ważnym czynnikiem pozwalającym uniknąć zakłóceń.
Odpowiednitechnika aseptycznajest ważne podczas przygotowywania i rozcieńczania standardów oraz postępowania z próbkami.Sukniapraktykować poza normalnymi laboratoryjnymi środkami ochrony osobistej (ŚOI) wymagań nie stanowi problemu, chyba że testowany produkt wymaga szczególnych względów bezpieczeństwa analityka ze względu na toksyczność lub zakaźność.Rękawicepowinien być wolny od TALC, ponieważ TALC może zawierać znaczne ilości endotoksyn.Czytniki płytek, łaźnie wodne i suche bloki grzewczeużywany do inkubacji próbek powinien znajdować się na stole laboratoryjnym z dala od kanałów grzewczych, wentylacyjnych i klimatyzacyjnych (HVAC), znacznych wibracji i ruchu laboratoryjnego, który mógłby mieć wpływ na wyniki testu.Przykładowe czasy i warunki przetrzymywanianależy określić, a następnie, jeśli to konieczne, udokumentować, aby zapewnić możliwość wygenerowania dokładnych wyników badań w odpowiednim czasie.
Na przykład, jeśli laboratorium otrzymuje wodę do wstrzykiwań (WFI) lub próbkę w trakcie procesu, czy należy ją przechowywać w lodówce, czy też można ją przechowywać w temperaturze pokojowej i jak długo?Przed badaniem zaleca się odpowiednie wymieszanie pojemnika(ów) próbki pierwotnej przed pobraniem próbki(ów) do bezpośredniego badania lub późniejszego rozcieńczenia.
Test na endotoksynę bakteryjną Bioendo, obejmuje eksperymentymetoda skrzepu żelowegotest na endotoksyny iilościowy test na obecność endotoksynMetoda testu endotoksyn metodą skrzepu żelowego to jakościowe wykrywanie endotoksyn. Eksperyment ten wymaga materiałów eksploatacyjnych do procesu depirogenizacji, takich jak probówki reakcyjne wolne od endotoksyn, probówki do rozcieńczeń i końcówki wolne od pirogenów;ilościowe wykrywanie endotoksyn posiada kinetyczny chromogeniczny test endotoksyn, kinetyczny turbidymetryczny test endotoksyn, w tym eksperymencie wymagane jest, aby materiały eksploatacyjne osiągnęły najwyższy poziom endotoksyn mniejszy niż0,005 EU/ml(0,001 EU/ml), takie jak probówki wolne od endotoksyn, końcówki wolne od pirogenów i mikropłytki wolne od pirogenów, a nawet zbiorniki wolne od pirogenów.Nawiasem mówiąc, jeśli próbki są poddawane obróbce, pojemnik musi być butelką na próbki niezawierającą endotoksyn.
W badaniu endotoksyn zakłócenia mogą pochodzić z różnych źródeł, takich jak składniki matrycy próbki, odczynniki testowe lub sprzęt.
Aby uniknąć zakłóceń eksperymentu, można podjąć następujące środki:
1. Przygotowanie próbki: Właściwe przygotowanie próbki jest niezbędne do dokładnego badania endotoksyn.
Matrycę próbki należy dokładnie przetestować i zoptymalizować, aby zapewnić zgodność z testem endotoksyn.
W szczególności należy usunąć lub zminimalizować substancje zakłócające, takie jak lipidy i białka, stosując odpowiednie techniki, takie jak filtracja lub wirowanie.
2. Kontrole pozytywne i negatywne: Istotne jest uwzględnienie w teście kontroli pozytywnych i negatywnych w celu monitorowania zakłóceń.
Kontrole pozytywne potwierdzają funkcjonalność testu, natomiast kontrole negatywne wykrywają wszelkie zanieczyszczenia lub zakłócenia ze strony składników testu.
3. Kontrola jakości: Należy przeprowadzić kontrolę jakości wszystkich odczynników, sprzętu i wody używanych w teście.
Dzięki temu odczynniki są wolne od zanieczyszczeń endotoksynami i działają prawidłowo.
4. Standaryzacja: Test powinien być standaryzowany, aby zapewnić porównywalność i powtarzalność wszystkich wyników.
Wiąże się to z wykorzystaniem krzywej standardowej do kalibracji testu i zastosowaniem standardowych technik przygotowania próbki, inkubacji i wykrywania.
5. Walidacja: Test należy poddać walidacji, aby upewnić się, że jest swoisty, czuły i wiarygodny.
Obejmuje to testowanie szeregu próbek, w tym tych, o których wiadomo, że zawierają endotoksyny, w celu określenia dokładności i precyzji testu.
Stosując się do tych środków, można zminimalizować zakłócenia i uzyskać dokładne badanie endotoksyn.
Czas publikacji: 01 grudnia 2022 r
